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大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因在大肠杆菌中的克隆和表达
时间:2013-02-17 浏览次数:1193次 无忧论文网
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【中文题名】 大鼠寡霉素敏感相关蛋白(OSCP)基因在大肠杆菌中的克隆和表达 【英文题名】 The Cloning and Expression of Oligomycin Sensitivity-Conferring Protein (OSCP) Gene in E.coli 【中文摘要】 经典的固醇类激素的作用是通过核受体途径发挥的。但越来越多的证据表明,固醇类激素还可通过所谓的膜受体途径激活胞内信号分子而发挥作用,所以研究固醇类激素的膜受体就显得特别有意义。 寡霉素敏感相关蛋白(oligomycin sellsitivity-conferring protein, OSCP)是ATP合成酶/ATP酶的一个亚单位。ATP合成酶/ATP酶是一个跨膜的多亚基复合体,广泛存在于线粒体、细菌、叶绿体的胞壁膜上,包括位于膜外的F1、位于膜内的FO以及连接二者的OSCP三部分组成。F1是ATP合成酶/ATP酶的活性中心,它可以催化ATP的合成和分解;FO作为质子通道,参与光合磷 【英文摘要】 The cloning and expression of Oligomycin Sensitivity Conferring Protein (OSCP) gene in E.coli It was reported that oligomycin sensitivity-conferring protein (OSCP), a subunit of proton F0Fl-ATPase/ATP synthase in the mitochondrial inner membranes, as a new estradial binding protein. This finding suggestes that mitochondrial ATPase/ATP synthase could be a potential target for estradiol or compounds with similar structures. Moreover, OSCP has been isolated and purified from the neuronal membrane of rat br 【中文关键词】 寡霉素敏感相关蛋白. ATP合成酶. 膜受体. 克隆. 亚克隆. 基因重组. 诱导表达. 【英文关键词】 oligomycin sensitivity-conferring protein. clone. subclone. gene modification. membrane receptor. ATP synthase/ATPase. induced expression. Abbreviations 4-007 中文摘要 007-010 Abstract 010-12 1 Introduction 12-14 2 MATERIALS AND METHODS 14-19 2.1 Animals 14-15 2.2 Chemical reagents and materials 15-15 2.3 Isolation of total RNA 15-15 2.4 Reverse transcription and polymerase chain reaction 15-16 2.5 Retrieve and purify cDNA 16-16 2.6 Ligation and transformation 16-17 2.7 the extract of the plasmid DNA 17-17 2.8 the restriction endonuclease digest the plasmid DNA 17-17 2.9 DNA Sequencing 17-17 2.10 expression of recombinant of OSCP 17-18 2.11 SDS-PAGE 18-19 2.12 Western-blot 19-19 3 RESULTS 19-30 3.1 The concentration and purification of the total RNA 19-20 3.2 The result of RT-PCR 20-20 3.3 The digestion of the plasmid DNA 20-23 3.4 DNA sequencing 23-26 3.5 Correction of mutation 26-27 3.6 Subclone to Expression Vector 27-29 3.7 SDS-PAGE and Western-blot 29-39 4 Discussion 30-33 Reference 33-39 Appendix 39-47 Buffer and solutions 39-50 综述 47-53 参考文献 50-54 Acknowledgements 53-54 Resume 54-54
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