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MDR1基因在白血病化疗中疗效及骨髓保护的研究
时间:2013-10-11 浏览次数:969次 无忧论文网
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【中文题名】 MDR1基因在白血病化疗中疗效及骨髓保护的研究 【英文题名】 The Effects on Protecting Hematopoietic Cells From Anticancer Agents in Vivo by MDR1-Transferred into Cord Blood Mononuclear Cells 【中文摘要】 目的:白血病是一种侵犯全身的非实体性血液系统的恶性肿瘤。白血病治疗不同于实体瘤,不能手术治疗,化疗显得尤为重要,化疗是治疗白血病的一种经典的、传统的、首选的重要方法。但是这种方法存在两大障碍:一是肿瘤细胞对化疗药物产生的药物耐受导致化疗失败,二是化疗药物对骨髓造血细胞产生毒性使化疗方案不能顺利实施。研究证明这两大障碍均与多药耐药(MDR1)基因及其表达产物P-gp有关,它在肿瘤细胞的高表达直接导致对化疗药物的耐药而致化疗的失败,而在骨髓干细胞的低表达使造血细胞受损引起骨髓抑制而化疗剂量、疗程受限导致化疗的失败。为 【英文摘要】 Objective: Leukemia is a disseminated non-solid malignancy of hematological system. The therapy of leukemia is different from that of solid malignancies. Leukemia cannot be excised by operation. Obviously chemotherapy is especially important to it. Chemotherapy is a typical, traditional, preferred and important treatment for leukemia but there are two barriers in it :one is the tumor cells resistance to anticancer agents, the other is the toxicity of chemotherapeutic agents to hematopoiesis. Some studies 【中文关键词】 多药耐药基因. 转染. 脐血单个核细胞. 细胞因子. 【英文关键词】 MDR1 gene. Transfer. Human Cord Blood Mononuclear Cells (CBMNC). Cytokine Vector. 缩略语 6-8 第一部分 :多药耐药基因转染脐血单个核细胞的体外研究 8-32 中文摘要 008-010 英文摘要 010-13 前言 13-14 材料与方法 14-20 一、 实验材料 15-16 二、 实验方法 16-20 (一) 包装细胞的培养 16-17 (二) 浓缩病毒上清法转染脐血单个核细胞 17-17 (三) 多聚酶联反应检测脐血单核个细胞中外源性多药耐药基因 17-18 (四) 免疫组化法测定脐血单个核细胞多药耐药基因转染率 18-19 (五) 流式细胞仪检测脐血单个核细胞柔红霉素泵出实验 19-20 (六) 流式细胞仪检测脐血单个核细胞的细胞周期生物学特性 20-20 (七) 脐血单个核细胞体外的扩增 20-38 结果 20-24 一、 包装细胞的逆转录病毒滴度 20-20 二、 外源性多药耐药基因在脐血单个核细胞中的整合与表达 20-21 三、 外源性多药耐药基因转染脐血单个核细胞P-gp阳性率 21-22 四、 外源性多药耐药基因转染脐血单个核细胞P-gp功能表达 22-23 五、 多药耐药基因转染脐血单个核细胞的细胞周期生物学特性 23-24 六、 脐血单个核细胞体外扩增结果 24-24 讨论 24-31 一、 多药耐药基因体外转染脐血细胞体系的建立 24-29 二、 多药耐药基因在脐血单个核细胞中的整合、表达与功能 29-37 结论 31-32 第二部分 :人类粒细胞白血病Scid小鼠模型的建立 32-49 中文摘要 32-34 英文摘要 34-37 前言 37-37 材料与方法 37-39 一、 实验材料 37-38 二、 实验方法 38-39 1、 人类粒细胞白血病细胞株的移植 38-38 2、 外周血白细胞计数及血涂片检测 38-38 3、 病理学检查 38-38 4、 流式细胞仪检测 38-58 结果 39-45 一、 发病情况 39-39 二、 外周血白细胞计数及血涂片 39-40 三、 病理检查 40-40 四、 流式细胞仪检测 40-41 五、 荷瘤鼠骨髓CD33+细胞率与肝、脾增殖期细胞比率的相关性 41-45 讨论 45-48 一、 ~{60}钴辐射量 45-46 二、 荷瘤量—接种HL-60细胞的量 46-46 三、 外周血白细胞计数与外周血涂片瘤细胞阳性率 46-47 四、 病理检测 47-47 五、 骨髓细胞CD33表面抗原表达 47-47 六、 肝、脾等脏器细胞周期 47-56 结论 48-49 第三部分 :MDR1基因在白血病化疗中疗效及骨髓保护的研究 49-81 中文摘要 49-51 英文摘要 51-55 前言 55-56 材料与方法 56-60 一、 实验材料 56-58 二、 实验方法 58-60 (一) 脐血单个核细胞(CBMNC)收集及MDR1基因体外转染 58-59 (二) Scid鼠预处理 59-59 (三) 白血病鼠模型制作 59-59 (四) 转基因脐血移植模型建立 59-59 (五) 转基因脐血移植SCID荷瘤鼠对抗癌药物骨髓毒性耐受性研究 59-60 (六) 数据处理 60-123 结果 60-72 一、 脐血单个核细胞的收集、扩增与转染 60-61 二、 转基因脐血移植SCID荷瘤鼠对抗癌药物的骨髓毒性耐受性检测 61-71 三、 MDR1基因定植在SCID荷瘤小鼠的检测结果 71-72 讨论 72-77 一、 脐血细胞的应用为MDR1基因转染开辟了广阔的前景 72-73 二、 转MDR1基因脐血MNC移植模型建立 73-75 三、 转基因脐血移植SCID荷瘤小鼠对抗癌药物的骨髓毒性耐受性 75-123 结论 77-123 参考文献 81-92 图片与图表 92-113 文献综述 113-122 致谢 122-123 学习期间发表论文 123-123
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